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维真生物推出腺相关病毒AAV包装服务

Adeno-Assoicated Virus (AAV) 包装服务

腺相关病毒是目前发现的一类结构最简单、无包膜的单链DNA缺陷型病毒,对分裂或者不分裂的细胞均具有感染能力。

重组腺相关病毒载体(rAAV) 源于非致病的野生型腺相关病毒,由于其安全性好、宿主细胞范围广(分裂和非分裂细胞)、免疫源性低,在体内表达外源基因时间长等特点,这些特点使重组AAV成为用于基因转移和基因治疗的一个非常有吸引力的工具载体。

迄今为止,许多临床试验使用腺相关病毒载体进行基因治疗,包括CFTR,Hemophilia B, Arthritis 和 Parkinson’s diseas,临床I期和II期试验都获得理想的结果。

Vigene 已经开发出强大和专业的AAV包装服务,可以为您提供小体积病毒原液和大体积定制纯化产品。我们的产品研发平台可以满足您所有科研和基因治疗 领域的需求。Vigene 强大 的AAV生产系统,使AAV作为一系列疾病的治疗手段变得非常简单。

腺相关病毒(AAV)包装方法

不同规格的rAAV产品(病毒滴度): 

 

Vigene为您提供了一整套设计、克隆、包装和生产可随时转染的重组 AAV 病毒的服务,还包括病毒制备、病毒提取、纯化和滴度测定等服务。

服务名称 产品类别 产品规格 病毒滴度
纯化AAV包装服务 纯化 500ul 1012 V.G/ml
纯化AAV包装服务 纯化 500ul 1013 V.G/ml
纯化AAV包装服务 纯化 500ul 1014 V.G/ml
纯化AAV对照 纯化 500ul 1012-13 V.G/ml

不同血清型的AAV在各组织器官细胞的亲和性: 

血清型 组织亲和性
AAV1 肌肉,心脏,骨骼肌(包括心肌),神经组织
AAV2 中枢神经,肌肉,肝脏,脑组织,眼,
AAV5 肺,眼,中枢神经,关节滑膜,胰腺
AAV6 肺,心脏
AAV7 肌肉,肝脏
AAV8 肝脏,眼,中枢神经,肌肉
AAV9 心脏,肌肉,肺(肺泡),肝脏,中枢神经

 

感染效率与不同细胞类型的对照表:  

 腺相关病毒感染细胞

如何测定病毒滴度: 

通过Q-PCR测定1ml样品中病毒基因组拷贝数并同标准样品相比较的来确定病毒滴度,下面通过数据展示如何测定AAV滴度。

腺相关病毒(纯化)

纯化后AAV病毒的纯度:

AAV蛋白质成分是VR1 82kDa,VR2 72kDa和VR3 62kDa。因此,一个纯化好的AAV在SDA-PAGE分析应该只显示三个主要的蛋白带。下面的图像显示是我们纯化AAV病毒的蛋白质成分。

Vigene腺相关病毒(AAV)服务类型

 腺相关病毒(AAV)载体克隆服务

—人源cDNA ORF 克隆

shRNA克隆服务

腺相关病毒(AAV)包装服务

—纯化AAV包装服务(1012 V.G/ml,1013 V.G/ml,1014 V.G/ml)

—纯化AAV对照

Vigene腺相关病毒服务优势:

1)载体全:近30多种组织特异性启动子(神经特异性启动子Human Synapsin、CamkIIα、GFAP等)和多种报告基因(EGFP、mCherry、RFP和luciferase等)可供客户选择;
2)货期短:AAV克隆载体均与我们18,000个预制人类全长cDNA ORF克隆载体MCS区通用;
3)滴度高:可提供 1012V.G/ml及以上滴度的病毒.,最高可达1014V.G/ml
4)多种血清型 :AAV1, AAV2, AAV5, AAV6, AAV7, AAV8 and AAV9……
5)安全性高:ITR序列和rep/cap基因分别由独立的质粒表达;
6)免疫原性低:AAV2 的基因组仅 4681 个核苷酸,便于用常规的重组 DNA技术进行操作,而且进行动物实验时造成的免疫反应小;

7)表达稳定:能介导基因的长期稳定表达。

Vigene 已经开发出强大和专业的AAV包装服务,可以为您提供小体积病毒原液和大体积定制纯化产品。我们的产品研发平台可以满足您所有科研和基因治疗领域的需求。Vigene 强大 的AAV生产系统,使AAV作为一系列疾病的治疗手段变得非常简单。

相关服务连接:

腺相关病毒服务

AAV载体克隆服务

AAV shRNA 载体构建服务

更多AAV载体信息请登录:http://www.vigenebio.cn/index.php?c=content&a=show&id=130 或您想咨询更多产品信息:请拨打400-077-2566咨询。

行业资讯:AAV应用:基因疗法&HIV疫苗:治愈艾滋的普罗米修斯之火

参考文献:

1、High-titer recombinant adeno-associated virus(AAV) production utilizing a recombinant herpes simplex virus type I vector expressing AAV-2 Rep and Cap ;J E Conway1, CMJ ap Rhys1, I Zolotukhin2,3, S Zolotukhin2, N Muzyczka2, G S Hayward1,4 and B J Byrne2,3

2、Robust cardiomyocyte-speeific gene expression following systemic injection of AAV:in vivo gene delivery follows a  poisson distribution 。

更多文献参考:http://www.vigenebio.cn/index.php?c=content&a=list&catid=124

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